수질 총대장균군 측정법 - 시험관법

수질오염공정시험기준(ES 04701.2c)

수질 총대장균군 측정법 - 시험관법

1.0 개요

1.1 목적

이 시험기준은 물속에 존재하는 총대장균군을 측정하는 방법으로 다람시험관을 이용하는 추정시험과 백금이를 이용하는 확정시험 방법으로 나뉘며 추정시험이 양성일 경우 확정시험을 시행한다.

 

1.2 적용범위

이 시험기준은 지표수, 지하수, 폐수 등에 적용할 수 있다.

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4.0 시약 및 표준용액

 

4.1 추정시험용 배지

정제수 1 L에 배지를 표 1 또는 표 2의 조성대로 넣고 가열하여 녹인 후, pH가 (6.9 ± 0.2)를 확인한 다음 다람시험관이 들어있는 시험관에 10 mL씩 나누어 넣고 121 ℃에서 15분간 고압증기멸균한다.

[주 1] 시료를 10 mL로 하는 경우는 배지의 농도를 2배로 하여 사용하여야 한다.

[주 2] 멸균 후 다람시험관에 기포가 있을 경우 배지를 사용할 수 없다.

4.2 확정시험용 배지

정제수 1 L에 배지를 표 3의 조성대로 넣고 가열하여 녹인 후, pH (7.2 ± 0.2)가 되도록 조정한 다음 다람시험관이 들어있는 시험관에 10 mL씩 나누어 넣고 121 ℃에서 15분간 고압증기멸균한다.

[주 3] 멸균 후 다람시험관에 기포가 있을 경우 배지를 사용할 수 없다.

4.3 희석액

ES 04701.1c 총대장균군-막여과법의 4.2 희석액에 따른다.

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7.0 분석절차

 

7.1 추정시험

7.1.1 시료를 10, 1, 0.1, 0.01, 0.001…… mL씩 되게 10배 희석법에 따라 희석하여 사용하며, 시료의 오염정도에 따라 희석배수를 다르게 할 수 있다. 각 희석단계마다 5개의 시험관을 사용하며, 시료의 희석은 시료의 최대량을 이식한 5개의 시험관에서 전부 또는 대다수가 양성이고, 최소량을 이식한 5개의 시험관에서 전부 또는 대다수가 음성이 되도록 희석하여야 한다.

 

7.1.2 희석된 시료를 다람시험관이 들어있는 추정시험용 배지(락토스 배지 또는 라우릴트립토스 배지)에 접종하여 (35 ± 0.5) ℃에서 (48 ± 3)시간까지 배양한다. 이 때, 가스가 발생하지 않는 시료는 총대장균군 음성으로 판정하고 가스발생이 있을 때에는 추정시험 양성으로 판정하며 추정시험 양성 시험관은 확정시험을 수행한다.

 

7.2 확정시험

백금이를 사용하여 추정시험 양성 시험관으로부터 확정시험용 배지(BGLB 배지)가 든 시험관에 무균적으로 이식하여 (35 ± 0.5) ℃에서, (48 ± 3)시간동안 배양한다. 이 때, 가스가 발생한 시료는 총대장균군 양성으로 판정하고, 가스가 발생하지 않는 시료는 총대장균군 음성으로 판정하며, 확정시험까지의 양성 시험관수를 최적확수표에서 찾아 총대장균군수를 결정한다. 최적확수표는 시료량이 10 mL, 1 mL, 0.1 mL의 희석단계에 대한 최적확수가 최적확수/100 mL로 표시되어 있어, 그 이상 희석을 한 시료는 희석배수를 곱하여야 한다.

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8.0 결과보고

총대장균군 시험관법 시험결과는 확률적인 수치인 최적확수로 나타내지만, 결과는 ‘총대장균군수/100 mL’로 표기하며, 반올림하여 유효숫자 2자리로 표기한다. 결과값의 유효숫자가 2자리 미만이 될 경우에는 1자리로 표기한다. 다만, 결과값이 소수점을 포함하는 경우에는 반올림하여 정수로 표기한다. 또한 양성 시험관수가 0-0-0 일 경우에는 ‘<2’로 표기하거나 ‘불검출’로 표기할 수 있다. 

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